近年来,肠癌发病率不断上升,且呈年轻化趋势。类器官技术的出现,为探究肠癌发病机制、寻找有效治疗靶点带来了新的希望和方向。在人肠癌类器官的培养过程中,需要添加多种生长因子和信号通路调节因子,以模拟肿瘤微环境,支持类器官的长期培养。
一 初始培养阶段
Wnt信号通路激活因子:Wnt-3a和R-spondin-1是维持干细胞增殖和类器官形成的关键因子。
BMP信号通路抑制因子:Noggin,用于抑制BMP信号通路,维持干细胞的未分化状态。
表皮生长因子:EGF,促进上皮细胞的增殖。
Rho激酶抑制剂:Y-27632,用于抑制细胞凋亡,促进干细胞的存活,通常在初次培养时添加。
二 维持和扩增阶段
Wnt信号通路激活因子:R-spondin-1和Wnt-3a。
BMP信号通路抑制因子:Noggin。
表皮生长因子:EGF,维持细胞的增殖。
TGF-β信号通路抑制剂:如 A83-01,防止细胞过度分化。
其他小分子抑制剂:如 p38 MAPK激酶抑制剂(SB-202190),可以显著提高类器官的形成效率和稳定性。
三 肿瘤特异性培养阶段
BMP 信号通路的抑制因子:Gremlin-1,可显著促进肠癌类器官的生长。
IL-6:在肿瘤微环境中表达显著增高,可促进肠癌类器官的生长。
四 优化和特殊应用阶段
Notch 信号通路激活因子:Jagged-1,维持类器官的增殖。
其他生长因子:如 HGF、FGF10 等,可根据具体实验需求添加。
对于人肠癌类器官培养,以经典的 WNER 组合(Wnt-3a、Noggin、EGF 和 R-spondin-1)为基础,同时结合肿瘤微环境中的特异性因子(如 Gremlin-1和IL-6),可以更好地模拟肠癌的生长环境。Arcegen不但提供上述人肠癌类器官培养所需的细胞因子,还提供现成的人肠癌类器官培养基套装3DCultr Intestinal Cancer Organoid Growth Medium (Human)。使用便捷,操作简单,更好助力您的科研之路。
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